辣椒花藥的培養！

來源：未知發布日期：2019-06-10 11:20【大中小】

由于夏季高溫多雨，各種菌類大量滋生，雖然此時的辣椒花藥最適宜誘導胚狀體產生，但過高的污染率導致了花藥培養效率變低。常規辣椒花藥接種方法是在超凈工作臺上進行，用尖頭鑷子挑開滅菌后的花蕾，夾取花藥接種至培養基中。辣椒花藥較小，鑷子夾取花藥易夾傷或夾死花藥，且該方法耗時長，所需人工成本高。另外，基因型特異性強也是限制花藥培養技術在辣椒遺傳改良中廣泛應用的因素。本研究通過改進花蕾滅菌和花藥接種方式，以及往培養基中添加抑菌劑，簡化了花藥培養技術流程，既能提高花藥培養操作效率，又有效降低了花藥染菌率；同時，采用該方法比較23個辣椒品種進行的花藥培養效果，篩選出高再生頻率的辣椒品種，以期為提高辣椒花藥培養效率，加快辣椒花藥培養技術的實用化奠定基礎。

目前，大多辣椒花藥培養文獻報道均采用花蕾直接滅菌，由于花萼與花瓣間隙中的細菌難以徹底殺死，接種后花藥染菌率仍然居高不下。本試驗剝去花蕾3/4的萼片再進行滅菌，花藥染菌率降低至5%以下，說明該方法更易殺死花蕾表面細菌和內生菌，具有可行性。常規的花藥培養基需要高壓滅菌，接種需要在超凈工作臺中用鑷子夾取花藥轉至培養基表面。該方法需要特定的試驗環境，且由于辣椒花藥小，接種花藥費時費工，難以進行規模化生產。其他植物進行組織培養時，研究者們提出了一種新的組織培養方法，即通過往培養基中添加抑菌劑，使植物組織培養脫離嚴格無菌的操作環境進行組織培養的一種方法，稱之為開放式組織培養。

目前，已廣泛應用于葡萄、香蕉、煙草等植物的組織培養中。在開放組織培養過程中，添加了抑菌劑的培養基不需要在高溫高壓下進行滅菌，接種外植體也不需要在超潔凈的工作臺上進行；因此，該方法從根本上簡化了組織培養環節，降低了成本。本研究中，選擇氨芐青霉素和兩性霉素B作為抑菌劑，用于在開放條件下博辣紅牛花藥培養。結果顯示，25mg/L的氨芐青霉素和25mg/L的兩性霉素B適宜用于辣椒花藥培養，花藥染菌率1.42%，死亡率為3.89%，愈傷組織誘導率為13.51%，胚狀體誘導率為3.87%，由此說明，25mg/L的氨芐青霉素和25mg/L的兩性霉素B適宜于用做開放式培養抑菌劑。

此外，還改進了花藥接種方式，試驗結果表明：徒手擠壓花藥可降低對花藥的傷害，花藥接種速度與傳統方法相比可提高2.18倍，說明徒手擠壓花藥省時、省工，可有效降低人工成本。作物花藥胚狀體誘導率與基因型密切相關。辣椒花藥培養受基因型、生長環境、植株狀態、培養基成分等多種因素的影響，基因型是影響辣椒花藥培養的重要因素之一。本研究也表明不同基因型間花藥胚狀體誘導率存在差異，且從23個基因型品種中篩選到了3個高誘導頻率的辣椒品種，其胚狀體誘導率大于5%，可滿足種質創新條件。
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